Назначение

D-10 предназначен для автоматического количественного определения гликированного гемоглобина HbA1c в цельной крови человека методом ионообменной высокоэффективной жидкостной хроматографии.

В зависимости от установленной программы и применяемого набора реагентов анализатор может использоваться для:

• определения HbA1c;
• мониторинга длительного контроля гликемии;
• лабораторной диагностики нарушений углеводного обмена;
• определения HbA2;
• определения HbF;
• формирования профиля HbA2/F/A1c;
• скрининга β-талассемии;
• выявления хроматографических признаков распространённых вариантов гемоглобина.

Исследования выполняются для диагностики in vitro профессиональным лабораторным персоналом.

Тип аналитической системы

D-10 представляет собой компактный автоматический анализатор на основе катионообменной ВЭЖХ.

Система автоматически выполняет:

1. идентификацию образца;
2. пробозабор из первичной пробирки;
3. разведение цельной крови;
4. введение подготовленной пробы в аналитический тракт;
5. градиентную подачу буферов;
6. разделение фракций гемоглобина;
7. фотометрическое детектирование;
8. построение цифровой хроматограммы;
9. расчёт концентрации или процентного содержания фракций;
10. формирование отчёта;
11. сохранение и передачу результата.

Встроенный компьютер и сенсорный интерфейс позволяют выполнять основные операции без отдельной рабочей станции.

Принцип ионообменной ВЭЖХ

Метод основан на различиях электрического заряда фракций гемоглобина.

Разведённый образец поступает в катионообменный аналитический картридж. Буферный градиент с изменяемой ионной силой последовательно элюирует фракции гемоглобина.

Разделённые компоненты проходят через фотометрическую проточную ячейку. Изменение оптического сигнала регистрируется системой и преобразуется в хроматограмму.

Программное обеспечение оценивает:

• время удерживания;
• площадь пика;
• относительную долю фракции;
• форму хроматографического профиля;
• наличие дополнительных пиков;
• соответствие установленным окнам;
• применимость результата HbA1c.

Программа D-10 Hemoglobin A1c Program

Основная программа предназначена для количественного определения HbA1c.

Характеристики рабочего процесса:

• время анализа — около 3 минут на образец;
• автоматический пробозабор;
• автоматическое разведение;
• автоматическая хроматографическая сепарация;
• двухуровневая калибровка;
• формирование числового результата;
• построение хроматограммы;
• отображение результата в единицах NGSP и IFCC;
• контроль аномальных пиков и профиля разделения.

Один набор D-10 Hemoglobin A1c Program рассчитан на выполнение до 400 исследований при соблюдении условий применения.

Программа D-10 Dual Program

Dual Program предусматривает две аналитические программы на одной платформе и одном комплекте реагентов.

Короткая программа Short A1c

Предназначена для быстрого определения HbA1c.

Время исследования составляет около 3 минут на образец.

Программа применяется преимущественно для:

• мониторинга сахарного диабета;
• диагностики нарушений углеводного обмена;
• профилактических исследований;
• динамического контроля HbA1c.

Расширенная программа HbA2/F/A1c

Расширенная программа выполняется приблизительно за 6,5 минуты.

Она обеспечивает одновременное количественное определение:

• HbA1c;
• HbA2;
• HbF.

Программа используется для:

• скрининга β-талассемии;
• оценки повышенного HbA2;
• оценки повышенного HbF;
• выявления аномального профиля гемоглобина;
• обнаружения хроматографических признаков распространённых вариантов HbS, HbC, HbD и HbE.

Один набор Dual Program рассчитан на выполнение до:

• 400 исследований HbA1c по короткой программе;
• либо 200 исследований HbA2/F/A1c по расширенной программе.

Фактическое количество зависит от рабочего режима, технических процедур, повторов и расхода реагентов.

Переключение между программами

Короткая и расширенная программы используют совместимый аналитический картридж и общий набор реагентов Dual Program.

Переключение выполняется через программный интерфейс без физической замены колонки между каждой серией.

При переходе между методами необходимо соблюдать требования инструкции к:

• калибровке;
• контролю качества;
• подготовке системы;
• последовательности запуска;
• стабильности реагентов;
• допустимому числу тестов.

HbA1c и клиническое применение

HbA1c отражает среднюю экспозицию эритроцитов к глюкозе в течение периода их циркуляции.

Показатель применяется для:

• мониторинга компенсации сахарного диабета;
• оценки эффективности сахароснижающей терапии;
• диагностики сахарного диабета при соблюдении клинических рекомендаций;
• выявления повышенного риска нарушений углеводного обмена;
• динамического наблюдения пациента.

Результат HbA1c не должен интерпретироваться изолированно при состояниях, изменяющих срок жизни эритроцитов.

На показатель могут влиять:

• гемолитические состояния;
• острая кровопотеря;
• недавнее переливание крови;
• анемии различного происхождения;
• беременность;
• хроническая почечная недостаточность;
• терапия, влияющая на эритропоэз;
• отдельные варианты гемоглобина.

Единицы результата

HbA1c может отображаться:

• в процентах по NGSP/DCCT;
• в ммоль/моль по IFCC.

Возможность одновременной выдачи обеих единиц упрощает использование результата в разных лабораторных и клинических стандартах.

Референсные интервалы и диагностические пороговые значения устанавливаются медицинской организацией с учётом действующих клинических рекомендаций.

Хроматограмма

Для каждого образца формируется цифровая хроматограмма.

Она содержит:

• пики разделённых фракций;
• время удерживания;
• площадь пиков;
• процентное содержание;
• обозначенные аналитические окна;
• данные калибровки результата;
• предупреждения и флаги.

Хроматограмма позволяет оценить:

• качество разделения;
• форму пика HbA1c;
• наличие дополнительных фракций;
• возможное присутствие варианта гемоглобина;
• возможную интерференцию;
• необходимость повторного исследования;
• необходимость подтверждающего метода.

Числовой результат не следует выдавать без оценки хроматограммы, если система формирует предупреждение или аномальный профиль.

Варианты гемоглобина

Расширенная программа формирует отдельные окна для распространённых вариантов:

• HbS;
• HbC;
• HbD;
• HbE.

Наличие пика в соответствующем окне является предварительным хроматографическим признаком, а не окончательной идентификацией варианта.

Для подтверждения могут потребоваться:

• повторное хроматографическое исследование;
• электрофорез гемоглобина;
• капиллярный электрофорез;
• исследование другим HPLC-методом;
• молекулярно-генетический анализ;
• анализ семейного анамнеза;
• консультация специалиста.

D-10 не должен позиционироваться как самостоятельная подтверждающая система диагностики всех гемоглобинопатий.

HbA1c при наличии вариантов гемоглобина

В расширенной Dual Program производителем предусмотрена возможность выдачи HbA1c при гетерозиготных вариантах:

• HbAS;
• HbAC;
• HbAD;
• HbAE.

Возможность выдачи результата зависит от:

• выбранной программы;
• формы хроматограммы;
• концентрации варианта;
• наличия дополнительных пиков;
• флагов системы;
• ограничений инструкции реагента.

При гомозиготных и двойных гетерозиготных состояниях, отсутствии HbA или выраженном нарушении срока жизни эритроцитов результат HbA1c может быть неприменим.

Тип образца

Основной материал — цельная венозная кровь с антикоагулянтом ЭДТА.

Для стандартной первичной пробирки анализатор выполняет:

• автоматический забор;
• автоматическое разведение;
• автоматическую подачу в аналитический тракт.

Ручное приготовление гемолизата при штатной работе не требуется.

Допустимые типы пробирок, антикоагулянт, минимальный объём и сроки хранения определяются инструкцией используемой программы.

Первичные пробирки

Система поддерживает совместимые первичные пробирки приблизительно:

• диаметром 12–16 мм;
• высотой 75–100 мм.

Для отдельных размеров применяются адаптеры.

Перед загрузкой необходимо проверить:

• соответствие пробирки;
• правильность установки;
• достаточный объём крови;
• отсутствие сгустка;
• качественное перемешивание;
• целостность крышки;
• корректность штрихкода.

Работа без снятия крышки допускается только для совместимой пробирки и штатной системы пробозабора.

Образцы малого объёма

Если пробирка несовместима со штатным пробозабором или содержит недостаточный объём, образец может исследоваться после ручного предварительного разведения в соответствии с инструкцией программы.

Для такой работы применяются:

• раствор Wash/Diluent;
• микропробирка;
• адаптер микропробирки.

Соотношение компонентов и порядок подготовки необходимо брать из действующей инструкции конкретного набора реагентов.

Загрузка образцов

Базовая система рассчитана на одновременную установку до 10 проб.

Такая конфигурация подходит для:

• небольших ежедневных серий;
• эндокринологических лабораторий;
• медицинских центров;
• лабораторий при поликлиниках;
• резервного участка HbA1c;
• лабораторий с малым и средним потоком.

После завершения серии оператор может загрузить следующий набор проб.

Опциональный Rack Loader

Модуль подачи штативов увеличивает вместимость до 50 образцов.

Rack Loader обеспечивает:

• автоматическую подачу пробирок;
• непрерывную загрузку;
• увеличение автономности;
• работу с пятью штативами по 10 проб;
• выделение срочной пробы STAT;
• уменьшение количества ручных операций;
• расширенный реагентный лоток;
• выполнение до 400 тестов без промежуточной замены комплекта при соответствующей программе.

Rack Loader является опцией и не должен указываться как штатная часть базового анализатора без подтверждения комплектации.

Производительность

Продолжительность анализа зависит от программы:

• HbA1c Short Program — около 3 минут;
• HbA2/F/A1c Extended Program — около 6,5 минуты.

Фактическая производительность зависит от:

• выбранного режима;
• количества калибровок;
• контроля качества;
• повторных измерений;
• наличия флагов;
• загрузки STAT;
• проведения технических процедур;
• установленного Rack Loader;
• состояния реагентов и аналитического картриджа.

Штрихкодирование

Считыватель штрихкодов применяется для идентификации образцов.

Штрихкодирование позволяет:

• связать пробирку с назначением;
• уменьшить ручной ввод;
• снизить риск перестановки проб;
• повысить прослеживаемость;
• автоматически передавать идентификатор в отчёт;
• связывать результат и хроматограмму;
• передавать данные в ЛИС.

Этикетка должна быть размещена в зоне считывания и не препятствовать работе пробозаборного механизма.

Интерфейс оператора

D-10 оснащён:

• встроенным компьютером;
• цветным сенсорным экраном;
• программным интерфейсом управления;
• автоматическим стартовым контролем системы;
• средствами просмотра хроматограмм;
• архивом результатов;
• модулем контроля качества;
• средствами экспорта данных.

Через интерфейс выполняются:

• выбор программы;
• регистрация образцов;
• запуск серии;
• просмотр результата;
• анализ хроматограммы;
• калибровка;
• контроль качества;
• контроль остатка реагентов;
• технические процедуры;
• передача данных.

Передача данных

Результаты могут передаваться:

• в лабораторную информационную систему;
• в сетевую папку;
• на совместимый USB-носитель;
• в файл;
• на опциональный принтер.

Экспорт хроматограмм позволяет хранить графический профиль вместе с числовым результатом.

Протокол и совместимость с конкретной ЛИС необходимо согласовывать до поставки.

Контроль качества

Встроенный модуль контроля качества поддерживает:

• фиксированные контрольные диапазоны;
• расчёт среднего значения;
• расчёт стандартного отклонения;
• расчёт коэффициента вариации;
• графики Леви—Дженнингса;
• хранение результатов QC;
• экспорт данных контроля качества;
• опциональные правила Вестгарда;
• возможность остановки обработки пациентских проб при неудовлетворительном QC.

Правила блокировки, периодичность контроля и допустимые пределы устанавливаются лабораторией.

Контрольные материалы

Для контроля могут применяться совместимые материалы Bio-Rad, включая:

• Liquichek Diabetes Control;
• Lyphochek Diabetes Control;
• Lyphochek Hemoglobin A2 Control.

Выбор материала зависит от используемой программы.

Для HbA1c и расширенной HbA2/F/A1c программы могут потребоваться разные контрольные материалы.

Калибровка

Количественное определение HbA1c использует двухуровневую калибровку.

Калибровка выполняется:

• при вводе новой серии реагентов;
• при установке нового аналитического картриджа, если это предусмотрено инструкцией;
• после перехода между программами в случаях, установленных производителем;
• при неудовлетворительном контроле качества;
• после отдельных технических вмешательств;
• по истечении установленного срока.

Перед повторной калибровкой необходимо исключить:

• ошибку контрольного материала;
• неправильное хранение реагентов;
• нарушение приготовления калибратора;
• проблему картриджа;
• ошибку пробозабора;
• техническую неисправность системы.

Реагентная система

Для программы HbA1c применяются системные компоненты:

• Elution Buffer 1;
• Elution Buffer 2;
• Wash/Diluent Solution;
• аналитический катионообменный картридж;
• калибраторы двух уровней;
• разбавитель калибратора;
• служебные материалы программы;
• параметры серии и метода.

Для Dual Program используется отдельный совместимый набор, позволяющий выполнять короткую и расширенную программы без замены реагентов между методами.

Не допускается применение стороннего картриджа или буферов без документально подтверждённой совместимости.

Прослеживаемость HbA1c

Результаты HbA1c:

• сертифицированы по NGSP для соответствующей программы;
• стандартизованы относительно DCCT;
• прослеживаются к референсной системе IFCC.

Прослеживаемость относится к HbA1c и не должна автоматически распространяться на все обнаруживаемые дополнительные пики или предполагаемые варианты гемоглобина.

Ограничения метода

D-10 не следует описывать как анализатор:

• общего анализа крови;
• клеточного состава крови;
• автоматической лейкоцитарной формулы;
• всех существующих гемоглобинопатий;
• окончательной идентификации варианта гемоглобина;
• молекулярно-генетического подтверждения талассемии;
• с обязательным Rack Loader в базовой конфигурации;
• с постоянной загрузкой 50 проб без опционального модуля;
• с одинаковой продолжительностью HbA1c и HbA2/F/A1c;
• с возможностью применения любых сторонних реагентов;
• автоматически устанавливающий диагноз сахарного диабета.

Результат оценивается с учётом хроматограммы, клинических данных и ограничений конкретной программы.

Преимущества

• Ионообменная ВЭЖХ. Выполняется физическое разделение фракций гемоглобина по заряду.
• HbA1c за 3 минуты. Короткая программа подходит для рутинного мониторинга диабета.
• Расширенная программа за 6,5 минуты. Одновременно определяются HbA1c, HbA2 и HbF.
• Две программы на одной платформе. Не требуется отдельный анализатор для HbA2/F.
• Количественный HbA2 и HbF. Система может применяться для скрининга β-талассемии.
• Выявление аномальных профилей. На хроматограмме отображаются дополнительные пики.
• Окна HbS, HbC, HbD и HbE. Упрощается предварительное обнаружение распространённых вариантов.
• NGSP и IFCC. HbA1c выдаётся в международно применяемых единицах.
• Автоматический пробозабор. Снижается количество ручных операций.
• Автоматическое разведение. Не требуется ручное приготовление стандартной пробы.
• Первичные пробирки. Образец загружается непосредственно в систему.
• Базовая загрузка 10 проб. Конфигурация подходит для небольших лабораторий.
• До 50 проб с Rack Loader. Повышается автономность при росте потока.
• Режим STAT. Срочный образец может получить приоритет при наличии загрузчика.
• Цифровая хроматограмма. Оператор контролирует качество разделения.
• Штрихкодирование. Уменьшается риск ошибки идентификации.
• Встроенный компьютер. Для основного управления не требуется отдельное рабочее место.
• Сенсорный экран. Основные операции выполняются непосредственно на приборе.
• Встроенный QC. Поддерживаются графики Леви—Дженнингса и статистика.
• Опциональные правила Вестгарда. Возможна автоматизация контроля аналитической серии.
• Передача в ЛИС. Числовые результаты и хроматограммы экспортируются в электронном виде.
• Компактное настольное исполнение. Анализатор занимает ограниченную площадь лабораторного стола.
• Действующее российское РУ. Модель зарегистрирована для обращения в РФ.

Применение

D-10 применяется для:

• количественного определения HbA1c;
• мониторинга пациентов с сахарным диабетом;
• оценки эффективности сахароснижающей терапии;
• диагностики сахарного диабета при соблюдении установленных критериев;
• выявления повышенного HbA1c;
• профилактических обследований;
• диспансерного наблюдения;
• предоперационного обследования;
• исследования HbA2;
• исследования HbF;
• скрининга β-талассемии;
• выявления предполагаемых вариантов гемоглобина;
• дополнительной оценки анемий;
• исследования аномальных хроматографических профилей;
• динамического наблюдения пациентов с гемоглобинопатиями.

Подходит для учреждений

D-10 подходит для оснащения:

• клинико-диагностических лабораторий;
• эндокринологических центров;
• диабетологических центров;
• городских и районных поликлиник;
• многопрофильных больниц;
• медицинских центров;
• диагностических центров;
• частных клиник;
• частных лабораторий;
• лабораторных сетей;
• гематологических лабораторий;
• педиатрических учреждений;
• перинатальных центров;
• центров репродуктивной медицины;
• центров профилактических осмотров;
• лабораторий с небольшим и средним потоком HbA1c;
• резервных лабораторных участков.